仙人掌花園植物生理學實驗細胞內原生質的化學組成(expp02 | 雙縮脲試劑顏色

1. · 2. 本氏液 (Benedict's) 檢定醣類是否為還原醣,還原醣和本氏液共熱會產生氧化亞銅(Cu2O) 紅色沉澱,若不含還原醣則呈清澈的藍色。

· 3. 雙縮脲試劑可檢驗具有2個以上胜 ... 修改日期2008年08月27日國立嘉義大學園藝學系植物生理學實驗下載word檔                   任課教師:蔡智賢系級: 學號: 姓名: 一、題目:細胞內原生質的化學組成二、實驗日期:年月日組三、實驗目的:瞭解原生質的化學組成、性質及其檢定方法四、實驗原理:   細胞內主要化學組成為蛋白質(protein)、醣類、脂肪、礦物鹽及維生素等,本實驗以雙縮脲試劑(Biuretreagent)檢驗蛋白質,碘液(I2-KI)及本氏液(Benedict's)檢定醣類,蘇丹紅(SudanⅢ)檢定脂肪,並以簡單的呈色或沉澱法檢定礦物鹽。

原理:1.澱粉(starch)與碘作用呈藍色反應2.本氏液(Benedict's)檢定醣類是否為還原醣,還原醣和本氏液共熱會產生氧化亞銅(Cu2O)紅色沉澱,若不含還原醣則呈清澈的藍色。

3.雙縮脲試劑可檢驗具有2個以上胜肽鍵結物質,如果鍵結少時,顏色呈紅色,多時呈藍色。

即用來檢驗蛋白質的存在4.用蘇丹紅(SudanIII)檢驗脂肪。

脂肪可溶於蘇丹紅,產生紅色反應五、材料與方法碘試劑(I2-KI)6mL 本氏液試劑(Benedict'sreagent)15mL2%(g/v)氯化鋇(BaCl2)5mL 雙縮脲試劑(Biuret'sreagent)10mL5%(g/v)硫酸銅(CuSO4)15mL 5%(g/v)草酸(Oxalicacid)5mL1%(g/v)葡萄糖(glucose)15mL 檸檬酸鈉173g無水碳酸鈉100g 5%(g/v)亞鐵氰化鉀(K4Fe(CN)6)5mL1%(g/v)氯化鈣(CaCl2)30mL 酒石酸鉀鈉9g0.2N氫氧化鉀40mL 0.2%(g/v)氯化鐵(FeCl3)15mL1%(g/v)澱粉(starch)15mL 1%(v/v)小牛血清蛋白(protein)15mL40%(g/v)氫氧化鈉50mL 恆溫水槽 試管21支/組 吸管3mL14支/組 藥品配法:1.碘試劑(I2-KI)每100.0mL水中含有I20.5g與KI1.0g貯於灰色瓶中。

2.本氏試劑將173.0g檸檬酸鈉與100.0g無水碳酸鈉溶於600.0mL水徐徐加熱,必要時過濾,然後加水稀釋至850.0mL。

將17.3g硫酸銅溶於150.0mL水中,然後將此硫酸銅溶液加入檸檬酸鈉溶液中。

3.雙縮脲試劑取9.0g酒石酸鉀鈉(potassiumsodiumtartrate)溶於40.0mL0.2N氫氧化鉀(potassiumhydroxide),再加入1.0g硫酸銅(cupricsulfate)混合使之溶解。

溶液中再加入1.0g碘化鉀(potassiumiodide)混合均勻,最後以0.2NNaOH稀釋至200.0mL,此試劑非常穩定。

實驗方法:(一)標準液測定1.澱粉的檢定取試管2支分別加入下列樣品2.0mL,A1澱粉溶液;A2蒸餾水,然後於各試管中加入5滴碘試劑。

2.還原醣與非還原醣的檢定取試管2支分別加入下列樣品1.0mL,B1葡萄糖溶液;B2蒸餾水,然後於各試管中加入3.0mL本氏試劑,然後放入水浴中加熱70℃,10分鐘。

3.蛋白質的檢定:取試管2支分別加入下列樣品1.0mL,C1小牛血清蛋白溶液;C2蒸餾水,然後於各試管中加入2.0mL雙縮脲試劑。

4.礦物鹽類的檢定4-1.鈣離子(Ca+2)取試管2支分別加入下列樣品3.0mL,D1氯化鈣;D2蒸餾水,然後於各試管中再加數滴草酸溶液。

4-2.硫酸根(SO4-2)取試管2支分別加入下列樣品3.0mL,E1硫酸銅;E2蒸餾水,然後於各試管中再加數滴氯化鋇溶液。

4-3.銅離子(Cu+2)取試管2支分別加入下列樣品2.0mL,F1硫酸銅;F2蒸餾水,然後於各試管中再加數滴亞鐵氰化鉀溶液。

4-4.鐵離子(Fe+3)取試管2支分別加入下列樣品3.0mL,G1氯化鐵;G2蒸餾水,然後於各試管中再加數滴亞鐵氰化鉀溶液。

(二)未知液測定1.取試管7支未知液進行檢定,方法如(一)標準液測定。

六、結果: 蒸餾水反應前反應後滴碘試劑(澱粉的檢定)  本氏試劑(還原醣與非還原醣的檢定)  雙縮脲試劑(蛋白質的檢定)  草酸溶液(鈣離子的檢定)  氯化鋇溶液(硫酸根的檢定)  亞鐵氰化鉀溶


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