雙縮脲反應 | 雙縮脲試劑顏色
由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能與銅離子在鹼性溶液中發生雙縮脲反應,且顏色深淺與蛋白質的含量的關係在一定範圍內符合比爾定律,而與蛋白質的 ...雙縮脲反應跳轉到:導航,搜索A+醫學百科>>雙縮脲反應紫色絡合物分子結構式在鹼性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC-NH-CONH2)能與銅離子(Cu2+)作用,形成紫色絡合物(該物質的分子結構式見圖),該反應即雙縮脲反應。
雙縮脲反應是肽和蛋白質所特有的,而為胺基酸所沒有的一種顏色反應。
一般分子中含有兩個氨基甲酪基(即肽鍵:-CO-NH-)的化合物與鹼性銅溶液作用,就會形成紫色或藍紫色絡合物。
註:除-CO-NH-有此反應外,(-CONH2-)、(-CH2-)、(-NH2-)、(-CS-CS-NH2)等基團亦有此反應。
雙縮脲反應的鑒定由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能與銅離子在鹼性溶液中發生雙縮脲反應,且顏色深淺與蛋白質的含量的關係在一定範圍內符合比爾定律,而與蛋白質的胺基酸組成及分子量無關,故可用雙縮脲法測定蛋白質的含量(藉助分光光度計可減小誤差)。
雙縮脲反應主要涉及肽鍵,因此受蛋白質特異性影響較小。
且使用試劑價廉易得,操作簡便,可測定的範圍為1~10mg蛋白質,適於精度要求不太高的蛋白質含量的測定,能測出的蛋白質含量須在約0.5mg以上。
雙縮脲法的缺點是精確度低、所需樣品量大。
干擾此測定的物質包括在性質上是胺基酸或肽的緩衝液,如TrIs緩衝液,因為它們產生陽性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時出現紅色沉澱。
配製雙縮脲試劑的注意事項雙縮脲試劑由NaOH溶液(0.1g/mL)和CuSO4溶液(0.01g/mL)配製而成,配製比例為5:1,注意必須即配即用。
出自A+醫學百科「雙縮脲反應」條目http://cht.a-hospital.com/w/%E5%8F%8C%E7%BC%A9%E8%84%B2%E5%8F%8D%E5%BA%94轉載請保留此連結關於「雙縮脲反應」的留言:訂閱討論RSS目前暫無留言添加留言更多醫學百科條目2個分類:化學|生物學個人工具登入/建立新賬號名字空間頁面討論檢視閱讀简体中文編輯修改修訂歷史動作搜索 導航首頁大醫精誠人體穴位圖中藥圖典醫學電子書藥品百科中醫百科疾病診斷急救常識疾病查詢中藥百科中醫方劑大全怎樣看化驗單醫事漫談醫學下載醫學視頻功能菜單志願者招募中關於廣告網站事務最近更改工具箱鏈入頁面鏈出更改所有特殊頁面可列印版此頁由A+醫學百科用戶行医於2011年9月18日(星期日)18:02的最後更改。
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雙縮脲反應是肽和蛋白質所特有的,而為胺基酸所沒有的一種顏色反應。
一般分子中含有兩個氨基甲酪基(即肽鍵:-CO-NH-)的化合物與鹼性銅溶液作用,就會形成紫色或藍紫色絡合物。
註:除-CO-NH-有此反應外,(-CONH2-)、(-CH2-)、(-NH2-)、(-CS-CS-NH2)等基團亦有此反應。
雙縮脲反應的鑒定由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能與銅離子在鹼性溶液中發生雙縮脲反應,且顏色深淺與蛋白質的含量的關係在一定範圍內符合比爾定律,而與蛋白質的胺基酸組成及分子量無關,故可用雙縮脲法測定蛋白質的含量(藉助分光光度計可減小誤差)。
雙縮脲反應主要涉及肽鍵,因此受蛋白質特異性影響較小。
且使用試劑價廉易得,操作簡便,可測定的範圍為1~10mg蛋白質,適於精度要求不太高的蛋白質含量的測定,能測出的蛋白質含量須在約0.5mg以上。
雙縮脲法的缺點是精確度低、所需樣品量大。
干擾此測定的物質包括在性質上是胺基酸或肽的緩衝液,如TrIs緩衝液,因為它們產生陽性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時出現紅色沉澱。
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